期刊简介
本刊是组织工程学和整形重建外科学的专业学术期刊,着重报道组织工程领域的基础研究,组织构建和生物材料研发,以及整形重建外科领域的重大进展、新技术和新动态。
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- 杂志名称:组织工程与重建外科杂志
- 主管单位:上海交通大学
- 主办单位:上海交通大学医学院附属第九人民医院
- 国际刊号:1673-0364
- 国内刊号:31-1946/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:期刊收录:统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏
Cathepsin K基因抑制后对软骨细胞功能的影响研究
柴岗;崔磊;张艳
关键词:组织蛋白酶k, RNA干扰, 软骨细胞, 去分化
摘要:目的 研究应用RNA干扰技术早期抑制人Cathepsin K(CTSK)基因的表达对延缓软骨细胞的去分化过程及维持软骨细胞表型的影响.方法 pGCsilencerTM H1/Neo/GFP/CTSK RNAi质粒体外转染人软骨细胞,并用G418筛选3周,再通过RT-PCR检测CTSK、Ⅱ型胶原和Aggrecan cDNA转录的表达,Western-Blot、免疫荧光检测转染后软骨细胞的CTSK、Ⅱ型胶原和Aggrecan在蛋白水平的表达.结果 装入质粒载体转染第1代的软骨细胞,在体外通过细胞形态观察可发现,抑制CTSK基因后3周软骨细胞仍大多数保持多角形,而对照组则向成纤维样细胞形态变化.RT-PCR结果 显示.在mRNA水平抑制了CTSK的表达,而不影响对软骨细胞Ⅱ型胶原和Aggrecan的mRNA表达.免疫荧光和Western-blot的结果 证实了在早期抑制了软骨细胞CTSK基因表达并维持3周左右,软骨细胞的特异性基质Ⅱ型胶原和Aggrecan在蛋白水平明显增加.结论 早期抑制了软骨细胞CTSK基因的表达,可使软骨细胞去分化过程中其软骨特异性基质Ⅱ型胶原和Aggrecan增加,说明可以维持软骨细胞的表型.
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