期刊简介
本刊是组织工程学和整形重建外科学的专业学术期刊，着重报道组织工程领域的基础研究，组织构建和生物材料研发，以及整形重建外科领域的重大进展、新技术和新动态。
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- 杂志名称：组织工程与重建外科杂志
- 主管单位：上海交通大学
- 主办单位：上海交通大学医学院附属第九人民医院
- 国际刊号：1673-0364
- 国内刊号：31-1946/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：期刊收录：统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏
应用AdEasy腺病毒载体系统构建血管内皮生长因子165重组腺病毒
高全文；宋慧锋；柴家科；柳春明
关键词：腺病毒, 血管内皮生长因子165, 基因工程
摘要：目的 利用AdEasy腺病毒载体系统构建血管内皮生长因子165(VEGF165)重组腺病毒,并在293T细胞中扩增.方法 将PCR获取的VEGF165基因酶切并插入到pAdTrack-CMV中,构建成腺病毒穿梭质粒pAdTrack-VEGF165,经Pme Ⅰ酶切线性化后,采用电穿孔转化到事先电转化腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183大肠杆菌感受态细胞中,挑选同源重组菌落.提取质粒并用Pac Ⅰ酶切鉴定,线性化重组质粒pAdEasy-VEGF165转染293T细胞,包装成重组腺病毒颗粒,荧光显微镜下观察绿色荧光表达,并扩增收集重组腺病毒,测定病毒滴度.结果 经限制性内切酶检测、基因测序及和绿色荧光观察证实成功构建了携带VEGF165基因的重组腺病毒,并扩增出109 pfu/mL的高滴度重组腺病毒.结论 成功构建了携带VEGF165基因的重组腺病毒载体,为研究骨组织工程血管化局部基因治疗奠定了基础.
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