期刊简介
本刊是组织工程学和整形重建外科学的专业学术期刊,着重报道组织工程领域的基础研究,组织构建和生物材料研发,以及整形重建外科领域的重大进展、新技术和新动态。
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- 杂志名称:组织工程与重建外科杂志
- 主管单位:上海交通大学
- 主办单位:上海交通大学医学院附属第九人民医院
- 国际刊号:1673-0364
- 国内刊号:31-1946/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:期刊收录:统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏
复合胶原酶消化法制备高纯度小鼠雪旺细胞
洪坦辉;金羽青;戴传昌;董佳生;祁佐良;王毅敏;刘伟;曹谊林
关键词:雪旺细胞, 纯化, 差速分离, 胶原酶, 周围神经再生
摘要:目的 建立高效、快速获得大量高纯度雪旺细胞的方法,为组织工程神经构建提供优质、足量的种子细胞.方法 取新生6~7 d的小鼠,在解剖显微镜下分离双侧坐骨神经,0.25%复合胶原酶37℃消化90 min,然后将细胞悬液接种于预先用层粘蛋白铺盘的培养瓶,贴壁培养48 h后,0.05%复合胶原酶37℃消化30 min,振荡分离雪旺细胞与成纤维细胞.经过两次纯化后,运用免疫细胞化学和流式细胞仪检测所得的雪旺细胞的纯度.结果 经过两次纯化后,P75NTR免疫细胞化学及流式细胞仪检测证实,通过本方法可获得纯度为99%以上的雪旺细胞,每个25 cm2培养瓶可获得(102.8±5.9)×104个细胞.结论 复合胶原酶差速消化法是一种高效、快捷的雪旺细胞纯化方法,仅需5 d即可制备高纯度的雪旺细胞.
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